Favorgen位于中國臺灣國家生物技術(shù)園區(qū)。它通過自動化系統(tǒng)建立了ISO合格工廠，
生產(chǎn)高質(zhì)量的分子生物學(xué)產(chǎn)品和臨床化學(xué)試劑。目前，F(xiàn)avorgen在美國，中國，韓國和丹麥設(shè)立分支機(jī)構(gòu)，并在30多個國家設(shè)立了分銷網(wǎng)絡(luò)。自成立以來，F(xiàn)avorgen已經(jīng)在其先進(jìn)的生產(chǎn)設(shè)施上投入了大量資金，以競爭力的價格為客戶提供高質(zhì)量的產(chǎn)品。Favorgen致力于通過與學(xué)術(shù)和行業(yè)合作伙伴的內(nèi)部和合作開展研究，以不斷提供高質(zhì)量的創(chuàng)新產(chǎn)品。

Nucleic-acids extraction Genomic DNA Extraction

核酸提取基因組DNA提取

Genomic DNA Extraction Blood DNA Mini / Midi / Maxi Kit

FavorPrepTM Blood Genomic DNA Extraction Mini Kit

Cat.No. : FABGK 000, 4 Preps

FABGK 001, 50 Preps

FABGK 001-1, 100 Preps

FABGK 001-2, 300 Preps

(For Research Use Only)

Kit Contents:

FABGK 000

sample)

FABGK 001

FABGK 001-1

FABGK 001-2

規(guī)格:

原理：自旋柱(硅膠膜)

樣本：全血、血清、血漿、體液多可培養(yǎng)5×10 6細(xì)胞。

手術(shù)時間：<30分鐘

結(jié)合容量：高可達(dá)60克/柱DNA產(chǎn)量：4~8微克/200升全血

重要說明：

本系統(tǒng)中提供的緩沖區(qū)包含刺激物。在處理這些緩沖器時，戴上手套和實驗室外套。

將蛋白酶K管保存在-20°C，然后再加入所需體積的無菌ddH2O到蛋白酶K管中，制成10毫克/毫升的原液。旋渦，確保蛋白酶K是復(fù)合的 泰利解散了。將庫存溶液存放在4°C。

次使用時，在W1緩沖液和洗滌緩沖液中加入所需體積乙醇(96%-100%)。

手術(shù)前將干洗或水浴預(yù)熱至60°C。

所有的離心步驟都是在微型離心機(jī)中全速進(jìn)行的(~18，000 x g)。

General Protocol:

“一般性議定書”：

提示：準(zhǔn)備一個干洗浴或水浴至60°C浴進(jìn)行第4步。預(yù)熱洗脫緩沖液至65°C為第13步(洗脫步驟)。

在開始以下步驟之前，請閱讀重要說明。

將多達(dá)200毫升的樣本(全血、血清、血漿、體液、布菲大衣)轉(zhuǎn)移到微離心管(未提供)。

如果樣品體積小于200毫升，加入適當(dāng)?shù)腜BS體積。

(可選)：如果需要無RNA的基因組DNA，在樣品中加入4升100 mg/ml的RNase A，在室溫下孵育2 min。

在樣品中加入20L蛋白酶K和200μl FABG緩沖液。通過脈沖旋渦充分混合.

不要直接將蛋白酶K添加到FABG緩沖液中。

在60℃下孵育15分鐘，以提取樣品。在孵化過程中，每隔3-5分鐘將樣品旋渦一次.

簡單地旋轉(zhuǎn)管子以去除從iid內(nèi)部滴下的液滴。

在樣品中加入200升乙醇(96%-100%)。用脈沖旋渦*攪拌10秒。

簡單地旋轉(zhuǎn)管子以去除從iid內(nèi)部滴下的液滴。

將FABG微型柱放置到收集管上。將混合物(包括任何沉淀物)小心地轉(zhuǎn)移到FABG微型柱上。離心機(jī)在6，000 x g下離心1分鐘，然后將FABG微型柱放置在nee上。 W收集管。

加入400升W1緩沖器到FABG迷你柱和離心機(jī)全速(18，000 x g)30秒，然后丟棄流過。

加入750升洗滌緩沖器到FABG迷你柱和離心機(jī)全速30秒，然后丟棄流過。

確保乙醇在次打開時加入到洗滌緩沖液中。

全速離心3分鐘，干燥柱。

重要的一步！這一步將避免殘留液體對后續(xù)酶反應(yīng)的抑制。

將FABG微型柱放置到發(fā)射管上。

在FABG微型柱膜中心加入50~200μl的洗脫緩沖液或DDH_2O(pH7.5-9.0)。將FABG微型柱站立3分鐘。

重要的一步！為了進(jìn)行有效的洗脫，要確保洗脫液被分配到膜中心并被*吸收。

全速離心1分鐘以逃避總DNA。

1. 將總DNA儲存在4°C或-20°C。特別議定書：

1.培養(yǎng)細(xì)胞

2. 收獲細(xì)胞

3. 懸浮培養(yǎng)細(xì)胞

4. ?.將適當(dāng)數(shù)量的細(xì)胞(多5×10)轉(zhuǎn)移到1.5毫升的微離心管中。??。300×g離心5 min。

5. ?.仔細(xì)而*地移除上清液。

6. 單層細(xì)胞

7. ?.通過胰蛋白酶化或使用細(xì)胞刮刀將細(xì)胞從盤子或燒瓶中分離出來。

8. ??.將適當(dāng)數(shù)量的細(xì)胞(多5×106)轉(zhuǎn)移到1.5毫升的微離心管中。

9. ?.300×g離心5 min。

10. ?v.仔細(xì)而*地移除上清液。

11. 再生細(xì)胞顆粒在PBS中的終體積為200毫升。

12. 從第二步開始遵循“一般議定書”。

布瓦大衣的制備

將全血在3，300 x g下在室溫下離心10分鐘，可得到三個不同的組分：上清層為血漿；中間層為布皮，內(nèi)含錐形。 額定紅細(xì)胞；下層含有濃縮的紅細(xì)胞。從步開始處理布菲大衣的一般協(xié)議。

從布菲皮毛中提取總DNA將比同等體積的全血產(chǎn)生5-10倍的DNA。

Troubleshooting

基因組DNA提取血液DNA Mini / Midi / Maxi試劑盒

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