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Enzymatics L6060L 說明書

更新時間：2018-04-11 點擊次數：2744

貨號：L6060L

品名：Taq DNA Ligase（Taq DNA連接酶）

產品描述：

使用NAD +作為輔因子，Taq DNA連接酶催化在含有相鄰5'-磷?；?'-羥基末端的雙鏈DNA中形成磷酸二酯鍵。

規格：	20,000 U
濃度：	40,000 U/ml
保存：	-25°C至-15°C
純度（SDS-PAGE）	> 99％
活性：	400,000 U/mg
SS核酸外切酶	400 U <5.0% released
DS核酸外切酶	400 U <1.0% released
DS內切核酸酶	400 U = No conversion
大腸桿菌 DNA污染	400 U <10 copies

蛋白質來源

重組大腸桿菌菌株攜帶Taq DNA連接酶基因的克隆。

提供：

10 mM Tris-HCl
50 mM KCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
0.1% Tween-20
50% glycerol
pH 7.5 @ 25°C

隨附：

B6060 (10X Taq DNA Ligase Buffer)

10X Taq DNA Ligase Buffer (B6060)：
200 mM Tris-HCI
250 mM KCl
100 mM MgCl2
5 mM NAD
0.1% Triton X-100
pH 7.6 @ 25°C

單位定義
1單位定義為在50μl1X Taq DNA連接酶緩沖液中10分鐘后加入1μg用Sma I和Sal I切割的Lambda DNA的12個堿基粘性末端的50％所需的Taq DNA連接酶的量在45℃孵育。

質量控制分析

單位表征測定
單位活性使用2倍系列稀釋法測量。在1X Taq DNA連接酶反應緩沖液中進行酶批次的稀釋并加入到50μL含有λHind III消化的DNA和1X Taq DNA連接酶反應緩沖液的反應中。將反應在45℃孵育10分鐘，停止，并在用溴化乙錠染色的0.8％瓊脂糖凝膠上分析。

SDS-Page（物理純度評估）

將2.0μL濃縮的酶溶液加載到變性的4-20％Tris-甘氨酸SDS-PAGE凝膠上，該凝膠側翼為寬范圍的MW標記和2.0μL的1：100稀釋的相同酶物種。電泳后，將凝膠染色并比較樣品以確定物理純度。該測試的驗收標準要求濃縮樣品中污染帶的總量不超過稀釋樣品中目的蛋白質條帶的質量，確認濃縮樣品的純度大于99％。

污染測試

單鏈核酸外切酶活性

將含有10,000cpm放射性標記的單鏈DNA底物的50μL反應液和10μL在37℃下孵育4小時的酶溶液導致TCA可溶性計數的釋放小于5.0％。

雙鏈核酸外切酶活性將含有5,000cpm放射性標記的雙鏈DNA底物和10μL酶溶液的50μl反應液在37℃下溫育4小時，導致TCA可溶性計數的釋放少于1.0％。

雙鏈核酸內切酶活性將含有0.5μgpENZuC DNA和10μL酶溶液的50μL反應物在37℃下溫育4小時，結果通過瓊脂糖凝膠電泳測定沒有肉眼可察覺地轉變為帶切口的環狀DNA。

大腸桿菌 16S rDNA污染測試
重復5μL酶溶液樣品變性，并在TaqMan qPCR測定中篩選污染性大腸桿菌基因組DNA，使用對應于16S rRNA基因座的寡核苷酸引物。測試的驗收標準是由3個重復的無模板對照樣品的平均值產生的閾值循環計數（C t）?；跓o模板對照 Ct值和標準曲線數據之間的相關性，該測定的檢測限為<10拷貝基因組/樣品。

部分產品信息：

貨號	品名	規格	濃度	品牌
N2070-10-L	ATP Solution	50 µmol	10 mM	Enzymatics
N2050-10-L	10 mM dNTP Solution Mix	100 µmol	10 mM	Enzymatics
N2010L	100 mM 75µmol dNTP Solution Set	75 µmol	100 mM	Enzymatics
N2010-A-L	100 mM dATP Solution	75 µmol	100 mM	Enzymatics
N2050L	100µmol dNTP Solution Mix	100 µmol	25 mM	Enzymatics
Y9180L	10x Uracil Cleavage System	750 Reactions	N/A	Enzymatics
P7670	2x HiFi PCR Master Mix	1 rxn	2x	Enzymatics
Y9420L	5x ER/A-Tailing Enzyme Mix	24 reactions	N/A	Enzymatics
Y9380L	E. coli Pyrophosphatase	50 U	100 U/mL	Enzymatics
Y9030L	E. coli Single-Stranded DNA Binding Protein	1.5 mg	2.75 mg/ml	Enzymatics
Y9140-HC-L	End-Repair Mix (High Concentration)	75 Reactions	1 Rxn/µL	Enzymatics
Y9140-LC-L	End-Repair Mix (Low Concentration)	200 Reactions	1 Rxn/µL	Enzymatics
Y9080L	Endonuclease VIII	10,000 U	10,000 U/ml	Enzymatics
P7600L	EnzScript™ (MMLV Reverse Transcriptase RNase H-)	10,000 U	200,000 U/mL	Enzymatics
X8010L	Exonuclease I	30,000 U	20,000 U/ml	Enzymatics
X8020L	Exonuclease III	50,000 U	100,000 U/ml	Enzymatics
P7010-HC-L	Klenow (3′→ 5′ exo-) (High Concentration)	10,000 U	50,000 U/ml	Enzymatics
P7010-LC-L	Klenow (3′→ 5′ exo-) (Low Concentration)	10,000 U	5,000 U/ml	Enzymatics
P7060L	Klenow Fragment	2,500 U	5,000 U/ml	Enzymatics
X8030L	Lambda Exonuclease	10,000 U	5,000 U/ml	Enzymatics
P7040L	M-MuLV Reverse Transcriptase	100,000 U	200,000 U/ml	Enzymatics
P7090L	Mako DNA Polymerase (3′→ 5′ exo-)	3,000 U	30,000 U/ml	Enzymatics
P7140-HC-L	Manta 1.0 DNA Polymerase (High Concentration)	100,000 U	400,000 U/ml	Enzymatics
P7140-LC-L	Manta 1.0 DNA Polymerase (Low Concentration)	100,000 U	40,000 U/ml	Enzymatics
P7610L	NGS Library Prep: 2X VeraSeq™ PCR Mix – 250 Reactions	250 Reactions	2X	Enzymatics
P7590L	Phoenix™ Hot Start Taq DNA Polymerase	500 U	5,000 U/ml	Enzymatics
P7460L	Poly(A) Polymerase	1,000 U	5,000 U/mL	Enzymatics
Y9260L	RecA	1.5 mg	2.0 mg/mL	Enzymatics
Y9220L	RNAse H	5,000 U	5,000 U/ml	Enzymatics
Y9240L	RNAse Inhibitor	20,000 U	40,000 U/ml	Enzymatics
L6010L	T3 DNA Ligase	900,000 U	3,000,000 U/ml	Enzymatics
L6030-LC-L	T4 DNA Ligase	150,000 U	120,000 U/ml	Enzymatics
L6030-HC-L	T4 DNA Ligase (Rapid)	240,000 U	600,000 U/ml	Enzymatics
P7080L	T4 DNA Polymerase	2,000 U	3,000 U/ml	Enzymatics
Y9130L	T4 Gene 32 Protein	1.0 mg	10 mg/mL	Enzymatics
Y9040L	T4 Polynucleotide Kinase	10,000 U	10,000 U/ml	Enzymatics
L6050L	T4 RNA Ligase 1	10,000 U	20,000 U/ml	Enzymatics
L6080L	T4 RNA Ligase 2	4,500 U	30,000 U/ml	Enzymatics
L6070L	T4 RNA Ligase 2 Truncated	500 U	5,000 U/ml	Enzymatics
L6020L	T7 DNA Ligase	900,000 U	3,000,000 U/ml	Enzymatics
P7260L	T7 DNA Polymerase	3,500 U	10,000 U/ml	Enzymatics
P7180L	T7 RNA Polymerase	50,000 U	50,000 U/ml	Enzymatics
L6060L	Taq DNA Ligase	20,000 U	40,000 U/ml	Enzymatics
P7110L	Taq DSC 2.0 DNA Polymerase	1,250 U	5,000 U/ml	Enzymatics
P7250L	Taq-B DNA Polymerase	10,000 U	5,000 U/ml	Enzymatics
P7620L	TaqIT	5,000 U	50,000 U/mL	Enzymatics
P7070L	Terminal deoxynucleotidyl Transferase (TdT)	6,000 U	20,000 U/ml	Enzymatics
G5020L	Thermolabile UDG	500 U	1,000 U/ml	Enzymatics
Y9370L	Thermostable Pyrophosphatase	1,250 U	2,000 U/ml	Enzymatics
G5010L	Uracil DNA Glycosylase	10,000 U	2,000 U/ml	Enzymatics
P7511L	VeraSeq™ 2.0 High-Fidelity DNA Polymerase	500 U	2,000 U/ml	Enzymatics
P7520L	VeraSeq™ ULtra DNA Polymerase	500 U	2,000 U/ml	Enzymatics
L6030-W-L	WGS Ligase	24 Reactions	N/A	Enzymatics
P7640L	ZipScript™ One-Step RT-qPCR Kit	1000 Reactions	N/A	Enzymatics
P7020-HC-L	φ29 DNA Polymerase (High Concentration)	2,000 U	100,000 U/ml	Enzymatics
P7020-LC-L	φ29 DNA Polymerase (Low Concentration)	2,000 U	10,000 U/ml	Enzymatics

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